طراحی و ساخت وکتور بیانی حاوی ژن کد کننده ی آنتی بادی تک زنجیره ی انسانی شده علیه tnf-? انسانی

فاکتور نکروزدهنده ی تومور، tnf-? ، یک سایتوکاین پیش التهابی است که بیان بیش از حد آن باعث برخی بیمار ی های التهابی یا خودایمنی می شود. برای درمان این بیماری ها tnf-? باید بلوکه شود. استفاده از بلوکه کننده ها علاوه بر هزینه های زیاد همراه با اثرات جانبی نیز می باشند، در بسیاری از بیماران در صورت استفاده ی مداوم علیه این عوامل آنتی بادی تولید می شود و حتی برخی از بیماران هیچ پاسخی به این عوامل نشان نمی دهند همه ی این عوامل باعث ایجاد نیاز برای تولید آنتی بادی جدید می شود. هدف این مطالعه تولید آنتی بادی با حداقل پاسخ ایمنی است به این منظور آنتی بادی d2 موشی برای انسانی شدن انتخاب شد برای این کار ابتدا ناحیه ی شاخص های مکملی (cdr) آنتی بادی d2 در مناطق cdr یک تک زنجیره ی انسانی جایگزین شد و در مرحله ی بعد انتقال این d2 انسانی داخل وکتور بیانی مناسب منجر به بیان d2 انسانی در باکتری e. coli سویه ی bl21 شد. d2 انسانی الحاق شده به gst (گلوتاتیون-s-ترانسفراز) با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی تخلیص گردید. همچنین افینیته این آنتی بادی نسبت به tnf-? انسانی(htnf-?) ارزیابی گردید، برای این منظور htnf-? بیان و تخلیص شد و کنش متقابل آن با آنتی بادی تولید شده، مورد ارزیابی قرار گرفت و نتایج بدست آمده حاکی از وجود کنش متقابل بین این دو پروتئین بود